Ang fluorescence microscope ay isang uri ng optical microscope na gumagamit ng high-intensity light source upang maipaliwanag ang specimen at pukawin ang mga fluorochromes sa sample. Ang pag-iilaw ng ispesimen ay karaniwang ginagawa sa isang pinagmumulan ng liwanag na naglalabas ng ultraviolet light. Malawakang ginagamit ang mga ito sa biyolohikal, medikal at pang-industriya na larangan.
Paano gumagana ang isang fluorescence microscope?
Gumagamit ang fluorescence microscope ng mercury o xenon lamp upang makagawa ng ultraviolet light. Ang liwanag ay pumapasok sa mikroskopyo at tumama sa isang dichroic mirror — isang salamin na sumasalamin sa isang hanay ng mga wavelength at nagbibigay-daan sa isa pang hanay na dumaan. Ang dichroic mirror ay sumasalamin sa ultraviolet light hanggang sa specimen. Ang ilang mga specimen ay natural na nag-fluoresce sa ilalim ng ultraviolet light dahil naglalaman ang mga ito ng mga fluorescent substance tulad ng chlorophyll. Kung ang specimen na titingnan ay hindi natural na fluoresce, maaari itong mabahiran ng fluorescent dyes na tinatawag na fluorochromes.
Ano ang binubuo ng fluorescence microscope?
1. Pinagmulan ng Banayad
Ang pinakakaraniwang pinagmumulan ng liwanag ay mercury, xenon, at LEDs. Nagbibigay ang Mercury ng pinakamahusay na kalidad ng liwanag para sa fluorescence microscope. Ang mga LED ay nagiging mas sikat dahil ang mga ito ay mas mura kaysa sa iba pang mga mapagkukunan at kumokonsumo sila ng mas kaunting kapangyarihan.
| Mercury Lamp | Xenon Lamp | LED | |
| Haba ng daluyong ng Inilabas na Liwanag | 350-370 nm | 400nm～ 450nm | 400-700 nm |
| Habambuhay(oras) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Advantage | 1. High Intensity Light, ang Pinakakaraniwang Pinagmumulan ng Liwanag. 2. Naglalabas ito ng malakas na ultraviolet at blue-violet upang pukawin ang lahat ng uri ng fluorophores. 3. Maliwanag at makulay na mga Larawan. | 1. Stable ang spectral intensity. 2. Malakas na parang multo intensity sa infrared at mid-infrared. | 1. Madaling palitan. 2. Hindi na kailangang magpainit. 3. Maaaring i-on at i-off kaagad. 4. Kontrolin ang intensity ng pinagmumulan ng liwanag. |
| Disadvantage | 1. Isang Maikling Buhay. 2. Mahabang oras ng warm up. | 1. Kinakailangan ang espesyal na low voltage DC power box para sa sobrang init. 2. Mas Mahal kaysa sa Mercury Lamp | 1. Ang UV light ay mas mahina kaysa sa mercury lamp. 2. Ang bawat wavelength ng liwanag ay nangangailangan ng isang hiwalay na LED dahil sa makitid na mga bandwidth na kanilang inilalabas. |
Mercury Fluorescent Attachment
LED Fluorescent Attachment
2. Filter ng Paggulo
Ang filter ng paggulo ay mahalaga para sa pagpapatakbo ng isang fluorescence microscope. Ito ay pumasa sa liwanag ng isang mas maikling wavelength, na maaaring makuha ng fluorescent dye. Gayundin, hinaharangan nito ang iba pang pinagmumulan ng kapana-panabik na liwanag.
Filter ng Excitation(B,G,U,V)
3. Dichroic Mirror
Ang dichroic mirror ay isang uri ng optical filter na sumasalamin sa liwanag sa ilang partikular na wavelength habang nagpapadala sa iba. Ginagamit ito sa mga fluorescence microscope upang paghiwalayin ang mga wavelength ng paggulo at paglabas.
4. Emission Filter
Ang emission filter ay pumasa lamang sa mga wavelength na ibinubuga ng fluorophore at hinaharangan ang lahat ng hindi gustong liwanag sa labas ng banda na ito - lalo na ang mga wavelength ng paggulo.
5. Fluorescent dyes
Ang mga fluorescent dyes ay mga organikong compound na nagtataglay ng isang katangian ng fluorescence, kung saan maaari silang bumuo ng isang fluorescent na imahe sa pamamagitan ng paglabas ng mataas na contrast na nakikitang berdeng ilaw pagkatapos na matuwa sa napakaliwanag na ultraviolet light. Ang mga karaniwang ginagamit na fluorescent dyes ay; DAPI (49,6-diamidino-2-phenylindole), acridine orange, auramine-rhodamine, Alexa Fluors, o DyLight 488.
Ilang uri ng fluorescence microscope?
1. Patayong Epifluorescence Microscope:
Ito ang pinakakaraniwang uri ng fluorescence microscope. Ang paggulo ng fluorophore at pagtuklas ng fluorescence ay ginagawa sa parehong liwanag na landas (ibig sabihin, sa pamamagitan ng layunin). Ang karamihan ng mga fluorescence microscope, lalo na ang mga ginagamit sa mga agham ng buhay, ay may disenyong epifluorescence.
BS-2081F Pananaliksik Fluorescent Biological Microscope
2. Confocal Fluorescence Microscope:
Confocal Fluorescence Microscope: Ang ganitong uri ng fluorescence microscope ay pinagsasama ang pag-scan ng laser sa fluorescent na pag-iilaw upang makagawa ng isang imahe. Maaari itong magamit sa malawak na hanay ng mga aplikasyon, tulad ng pag-aaral ng mga cell at tissue, pag-detect ng mga protina at iba pang mga sangkap sa loob ng mga cell, at pagsukat ng kapal ng mga materyales.
BS-2081F Pananaliksik Fluorescent Biological Microscope
3. Inverted Fluorescence Microscope
Ang ganitong uri ng light source at condenser ng mikroskopyo ay matatagpuan sa itaas, nakaharap pababa. Ang anggulo ng pag-iilaw ay dapat nasa 90 degrees na may paggalang sa ibabaw ng ispesimen na sinusuri.
BS-2095F Inverted Fluorescent Microscope
Ano ang mga pakinabang at disadvantages ng fluorescence microscopes?
Mga kalamangan:
- Pinapagana ang pagmamasid sa mga selula sa mga buhay na organismo nang hindi nasisira ang mga ito
- Nagbibigay ng mataas na resolution ng mga imahe na may tumpak na mga kulay
- Nagbibigay-daan para sa pag-aaral ng mga live na proseso sa mga cell
- Gamitin upang matukoy ang iba't ibang uri ng mga molekula sa loob ng mga selula, tulad ng mga protina o nucleic acid.
Mga disadvantages:
-Pinapayagan lamang nito ang pagmamasid sa mga partikular na istruktura sa loob ng isang cell na may tag na fluorescent dye.
-Ang photobleaching dahil sa electron excitation sa panahon ng proseso ng fluorescence ay maaaring makaapekto sa mga reaktibong molekula ng fluorescent dyes. Bilang resulta, ang mga reaktibong tina ay maaaring mawala ang kanilang kemikal na katangian ng intensity ng paglabas ng fluorescence.
-Ang mga cell ay madaling kapitan sa phototoxic effect pagkatapos ng paglamlam ng mga fluorescent dyes, dahil ang mga molekula ng fluorophore ay sumisipsip ng mataas na enerhiya na mga photon mula sa maikling-wavelength na ilaw.
Ano ang mga aplikasyon ng isang fluorescence microscope?
Ang mga fluorescence microscope ay malawakang ginagamit sa iba't ibang larangan ng pananaliksik at aplikasyon kabilang ang biochemistry, cell biology, microbiology, immunology, at gamot.
1. Sa larangan ng biology, ang fluorescence microscope ay nagbibigay-daan sa tumpak at detalyadong pagkakakilanlan ng cellular at submicroscopic cellular na mga bahagi at aktibidad sa tulong ng fluorescent dye labeling.
2. Sa larangang medikal, ang mikroskopyo ng fluorescence ay maaaring gumamit ng mga fluorescent reagents upang makita ang presensya at pamamahagi ng mga bakterya at mga virus, o upang tumulong sa pag-label ng mga target sa operasyon upang mapadali ang operasyon.
3. Sa larangan ng mineralogy, ang fluorescence microscope ay kadalasang ginagamit sa pag-aaral ng mga substance na may spontaneous fluorescence properties, tulad ng aspalto, petrolyo, karbon, graphene oxide at iba pang mineral.
4. Sa agham ng mga materyales, ang fluorescence microscope ay maaaring gamitin sa industriya ng tela o industriya ng papel upang pag-aralan ang mga materyales na nakabatay sa hibla.
Oras ng post: Mar-14-2023